Os óleos essenciais, isolados de diferentes partes das plantas, são procurados pelas suas propriedades cal-mantes e relaxantes, bem como pela sua atividade antifúngica, antibacteriana e antiparasitária. O objetivo deste trabalho foi realizar a caracterização química do óleo essencial de Hedyosmum brasiliense (EOHb), visando o desenvolvimento de uma formulação de enxaguante bucal de baixo custo para comunidades vulneráveis. A avaliação da atividade antibacteriana e modulação da resistência bacteriana foi estudada por um método de microdiluição que permitiu a determinação da concentração inibitória mínima (CIM). A caracterização química do óleo essencial por cromatografia gasosa acoplada à espectrometria de massas, identificou 15 constituintes químicos, sendo Biciclogermacreno, Carotol, Atractilona e Sabineno os quatro componentes majoritários. O EOHb teve uma concentração inibitória mínima de CIM ≥ 1024 μg/mL para todas as cepas bacterianas testadas. A avaliação da atividade moduladora do EOHb quando combinado com clorexidina, enxaguante bucal e antibióticos (ampicilina, gentamicina e penicilina G) contra a resistência bacteriana, mostrou atividade sinérgica significativa, reduzindo a CIM dos produtos testados em combi-nação, entre 20% a 87,5%. Portanto, esta abordagem mostra benefícios potenciais substanciais e os testes devem ser ampliados para incluir uma maior variação de concentrações de EOHb e combinações de pro-dutos, bem como avaliação de toxicidade e testes in vivo, buscando o desenvolvimento de uma possível formulação de colutório bucal de baixo custo e acessível.